糖尿病足感染病原菌分布特点及血清CRP、TNF-α、PCT的变化分析

胡琼雅

三门峡市中医院检验科(河南 三门峡 472000)

糖尿病足是糖尿病患者因血管或神经病变、感染等原因导致的下肢组织破坏的一种病变,属于糖尿病患者常见慢性并发症[1]。患者通常存在下肢远端神经异常及不同程度的足部感染、溃疡症状,是导致糖尿病患者残疾或截肢的主要原因[2]。目前,糖尿病足感染的发生机制尚不清楚,或与多种细胞因子相关[3]。C-反应蛋白(CRP)及降钙素原(PCT)是临床常见的感染指标,在不同的感染性疾病中体现出较好的诊断价值,其水平的提升预示着糖尿病足病情进展严重[4]。TNF-α是炎症标志物之一,当患者疾病恶化后炎症反应上升,表达量明显升高[5-6]。基于此,本研究通过对66例患者病历资料进行回顾性分析,旨在探究血清CRP、TNF-α、PCT指标在糖尿病足感染及不同程度感染患者中的变化,为深入了解患者病变的发生提供依据,现报道如下。

1.1一般资料回顾性分析三门峡市中医院2018年9月-2021年9月收治的66例糖尿病足感染患者的临床资料。纳入标准:①符合中国糖尿病足诊断标准(2019版)[6]中相关标准,临床表现足部出现感染、组织破坏或溃疡,伴有下肢血管病变或下肢神经病变;②存在明显的足部感染性并发症;③临床资料完整;④近期未服用相关抗菌药物;⑤无妊娠期女性;⑥无恶性肿瘤疾病;⑦无认知障碍、精神疾病。排除标准:①过敏体质;②凝血功能障碍;③免疫系统疾病、造血系统疾病;④糖尿病急性并发症;⑤其他感染性疾病。感染组66例中,男性39例、女性27例,年龄33～74岁,平均(62.35±7.11)岁,糖尿病病程2～15年,平均(9.66±2.34)年;选取60例糖尿病足未并发感染患者作为未感染组,纳入标准:①符合世界卫生组织糖尿病足诊断标准;②无足部感染性并发症;③临床资料完整;④无妊娠期女性;⑤无恶性肿瘤疾病;⑥无认知障碍、精神疾病。排除标准:①过敏体质;②凝血功能障碍;③免疫系统疾病、造血系统疾病;④糖尿病急性并发症。未感染组60例中,男性36例、女性24例,年龄35～78岁,平均(63.01±7.51)岁,糖尿病病程3～16年,平均(9.78±2.41)年;另选取同期在本院进行健康体检的60例健康人作为健康对照组,其中男性37例、女性23例,年龄31～75岁,平均(61.79±7.13)岁,3组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),所有研究对象均对研究知情同意,且获得伦理委员会审批。

1.2方法病原菌检测:取糖尿病足感染患者创面分泌物样本,标本采集前先用无菌生理盐水清创,冲去污染物和坏死物,用镊子轻刮创面底部与正常组织相邻接处的炎症组织,令少许炎症组织浮起,再用盐水湿润的无菌棉拭子采集样本,获得标本后立即送往实验室。在生物安全柜内将采样拭子接种于血平板和巧克力上,将血平板和巧克力放入温度35℃、CO2浓度5%～10%的培养箱(BIOBASE-QP-50)中进行培养,24h后使用法国生物梅里埃公司生产的VITEK2-compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统仪对目标菌进行细菌的鉴定和药敏的报告。

糖尿病足感染Wagner分级标准[7]:轻度感染,0～1级,溃疡面与红肿直径<2cm;中度感染,2～3级,溃疡面直径≥2cm,溃疡向深层组织蔓延;重度感染,4～5级,存在中毒情况。

收集所有患者入院当天空腹肘静脉血3～5mL,3500r/min离心10min后保存上层血清待测。使用贝克曼AU680全自动生化分析仪,免疫比浊法检测血清CRP水平;使用迈瑞CL-2000i全自动化学发光分析仪,化学发光法检测血清PCT水平;将血清外送第三方检测机构进行TNF-α的检测。

2.166例糖尿病足感染患者病原菌分布情况66例糖尿病足感染患者中,共分离出72株病原菌,其中革兰阴性杆菌占比最高,为54.2%,革兰阳性球菌与真菌分别占比41.7%、4.1%,见表1。

表1 66例糖尿病足感染患者病原菌分布情况n(%)

2.2不同组别患者血清CRP、TNF-α、PCT水平比较感染组血清CRP、TNF-α、PCT水平均较未感染组、健康对照组高,未感染组血清CRP、TNF-α、PCT水平较健康对照组高(P<0.05),见表2。

表2 不同组患者血清CRP、TNF-α、PCT水平比较结果

2.3不同程度糖尿病足感染患者血清CRP、TNF-α、PCT水平比较重度感染组血清CRP、TNF-α、PCT水平显著高于中度与轻度组(P<0.05),见表3。

表3 不同程度糖尿病足感染患者血清CRP、TNF-α、PCT水平比较

2.4糖尿病足感染、糖尿病足感染程度与血清CRP、TNF-α、PCT水平的相关性分析Pearson相关性分析结果显示,糖尿病足感染、糖尿病足感染程度均与血清CRP、TNF-α、PCT水平呈正相关(P<0.05),见表4,图1-2。

图1 糖尿病足感染与血清CRP、TNF-α、PCT水平的相关性散点图

图2 糖尿病足感染程度与血清CRP、TNF-α、PCT水平的相关性散点图

表4 糖尿病足感染、糖尿病足感染程度与血清CRP、TNF-α、PCT水平的相关性分析结果

糖尿病足属于足部神经病变而引起的下肢功能损伤状态,患者大血管及微血管出现异常,导致动脉功能损伤,从而出现微循环障碍与溃疡[8]。糖尿病足感染后病情迅速恶化,若不及时进行干预,将导致下肢截肢及残疾[9]。对糖尿病足感染病原菌分布情况进行分析,是临床及时选取有效抗生素治疗的关键,能有效控制糖尿病足溃疡感染进程[10]。另外,糖尿病足感染的发生与多种因素相关,故对与病情相关指标进行测定有利于对患者病情进行有效把握,为临床制定有效的治疗方案提供参考[11]。

本研究结果显示,66例糖尿病足感染患者病原菌分布中多见革兰阴性杆菌,其次为革兰阳性球菌及真菌,革兰阳性菌中以金黄色葡萄球菌为主,革兰阴性杆菌中以肺炎克雷伯菌肺炎亚种为主,真菌以白色念珠菌为主,与以往研究大致相似[12],同时感染患者以病原菌混合感染较多,这在重度感染患者中更为常见,究其原因在于糖尿病足患者足部感染后,血糖明显上升,溃疡位置给细胞生长提供了有利环境,且患者血糖的增长导致免疫细胞水平降低,患者更容易受到各类细菌的侵袭,导致混合感染。感染组血清CRP、TNF-α、PCT水平较未感染及健康对照组高,重度感染组患者血清CRP、TNF-α、PCT水平较中度及轻度感染组高,进一步采取相关性分析,结果显示血清CRP、TNF-α、PCT水平与糖尿病足感染及患者感染程度呈正相关性,这可能是因为CRP是急性时相反应蛋白之一,对于评估感染性疾病具有一定的价值[13],当感染性疾病发作后,CRP表达量迅速上升,当病情得到控制后恢复正常。以往研究表明[14]健康人群的CRP水平多在10mg/L以下,与本研究中健康对照组水平相似。TNF-α是炎症反应的重要调节介质,由单核巨噬细胞产生,具备抗肿瘤、参与炎性反应应答及调节免疫的作用,其通过肿瘤坏死因子受体超家族成员受体介导,促使多种细胞凋亡,故当TNF-α水平上升预示病情加重[15]。当糖尿病足感染时外周血单核细胞活性程度较高,导致促炎细胞因子大量生成,抗炎因子表达减少,活化的单核细胞分泌出大量的TNF-α。PCT在健康人群中含量极低或无法检测出,但患者机体存在炎症反应时PCT表达水平明显增加,PCT以往多为细菌感染的标志性指标,其属于一种糖蛋白,本身不存在生物活性,但糖尿病足患者感染后PCT表达量明显上升,故能够将其作为病情诊断及转归的重要依据[16]。

综上所述,糖尿病足感染患者病原菌以革兰阴性杆菌为主,革兰阳性球菌次之,糖尿病足患者是否发生感染及感染程度与血清CRP、TNF-α、PCT指标均表现为显著正相关,将其应用在糖尿病足患者早期评估中,能够为患者预后良好提供一定基础。但本研究还存在缺陷,例如样本的数量较小,且未对不同感染程度的患者再进行级别的细分,在今后研究中将会针对性改进。

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