水质环境监测中微生物检测技术及其质量控制研究

贺莉明

（山西来泽检测技术有限公司，山西 太原 030006）

微生物检测技术作为水质环境检测中常用检测技术，其在具体应用中仍然存在诸多检测质量影响因素，如样品采样技术、实验设备及器材、实验工作人员、材料品质、分析测试步骤等。针对此种情况，应对微生物检测技术进行全方位质量控制，进而保障水质环境检测中微生物检测结果的精准性。因此，对水质环境监测中微生物检测技术及其质量控制进行研究分析，将有着一定的现实意义。

在不同的时间及空间范围内，水质环境检测中采集的水体样品也存在一定差异，所以为保障所采集的水样具有较强的代表性，应在水样采集前合理设置固定取水点和取样时间。水样采集过程中应确保所采集水量为容量瓶容量的80%，尽可能避免水样量过多或者过少，以便于检测时水样的充分混匀，提高水样微生物检测质量。具体水样采集方法应为直接采集，严禁使用采集点水样清洗无菌采样瓶，避免其他物品对采样瓶进行污染。采样过程中应保证水样的清澈，尽可能采集上层水样[1-2]。

供水管网水样采集前应对取水点的金属水龙头进行火烧灼3～5 s，然后放水5～10 min，完成以上操作后再进行水样采集。农村生活用水采集则应采用清洁干净水桶进行提水，此过程中尽可能不取表面水，提水后将水样灌入采样瓶中，并注意勿用手指或者其他物品接触采样瓶瓶口，避免对水样造成污染。所有采集的水样均需要在有效固定条件下低温冷藏保存，并在采集后立即运至实验室进行实验检测。

2.1 仪器设备校检

水质环境检测中微生物检测技术常用仪器设备包括温度计、pH 计、天平、灭菌箱、滤膜装置、培养箱、紫外灯以及其他仪器设备等。为保障各类仪器设备的精准性，避免因仪器设备精准性问题而导致的检测精度下降情况，应在实验开始前定期对仪器设备进行校检，若是发现仪器设备存在精度问题，应对问题进行及时解决。此外，在日常保管过程中应重视仪器设备的保养处理。例如，针对紫外灯保养，应每间隔一个月使用紫外光度计对紫外灯进行测量，保证紫外灯所释放出的紫外光强度可以达到紫外灯出厂时紫外光强度的70%以上，确保紫外灯的杀菌使用效果；
再比如，针对培养箱，应以每天两次的频率对培养箱的使用温度进行检验，最佳使用温度应控制在16～27 ℃区间范围内。若是在仪器设备校检中发现仪器设备存在损坏、老化以及其他无法使用情况，应及时对问题设备进行及时检修和更换，避免后续使用精度受到影响[3]。

2.2 实验室环境控制

实验室应具有良好的通风措施，并且能够有效避免实验室内存在灰尘、温度以及湿度变化，为实验中微生物培养提供最佳环境支持，减少环境因素对实验中微生物培养稳定性的影响，提高实验精度。其次，在实验前，应根据实验室工作特点，合理设置人员管理原则，并由此保障所有实验室进出人员均按照要求进行消毒杀菌处理，避免人员进出所导致的实验室环境污染问题。再次，实验室内墙壁应遵循光滑、易于清洗和消毒等要求，并且地面、工作台均需要采用实验室专用材料，其中工作台还需要落实光滑、无缝、抗渗透、不透水等要求。最后，实验室内应采用RODAC 平皿、细菌密度平皿等多种方法对实验室内部空气质量以及台桌面污染情况进行检测分析，确保空气及台桌面污染问题的及时发现和解决。

3.1 已制培养基控制

微生物水样在采集后应立即送至水质检测室进行实验检测。整个实验中所采用的各类仪器设备均需要在使用前进行彻底清洗及杀菌，然后严格按照操作流程要求进行水质微生物样品检测操作。此过程中所涉及的培养基和稀释液均需要通过高压蒸汽灭菌，避免杂余细菌对整个培养基环境造成污染。针对已制成培养基，应通过标签在培养基上直接注明培养基的配制人、配置时间、配置批次、配置数量、灭菌温度、灭菌时间、培养基、pH 值名称等诸多信息，为后续培养基检验匹配提供重要信息支持[4-5]。

3.2 检测菌落总数控制

在对培养基进行菌落接种前，应将待检测水样进行充分摇匀，促使水样中细菌能够均匀分布在水中。水样稀释过程中，应将水样沿管壁进行缓慢加入，并且水样加入过程中要避免吸管端部与管内稀释液接触，以此来避免吸管沾有管内检液。在将水样注入到培养皿中时，应确保水样在培养皿侧边处加入，并且加入时仅需要揭开一部分培养皿盖，不应完全揭开培养皿盖，然后将吸管以直立滴入方式保证吸管内水样完全排空，并且此过程中应避免吸管出现吹出等情况，避免后续培养皿培养时出现片状菌落。在水样加入培养皿中20 min 后，应在培养皿中加入营养琼脂，并立即对培养皿进行混匀处理。待培养皿中营养琼脂完全凝固后，将培养皿进行翻转培养，避免培养皿中细菌培养过程中出现蔓延生长情况。针对菌落质量控制，则应在培养后的菌落中合理挑取典型菌落，若是没有典型菌落，则应合理选择多个菌落进行实验检测分析，避免实验结果出现假阴性情况。

4.1 操作方法精度控制

在某批次水样中，优先选择若干个岩性水样进行双样分析。在对数据的对数进行计算分析时，若某一双样分析结果存在任一为零情况，则需要在该双样分析结果所对应的双样进行加1 处理，然后再进行对数值计算。在计算出对数值以后，对每一双对数的差域进行计算，此差域值可采用R 进行表示，并计算出相关对数差域的平均值。此外，精度控制中还需要取10%左右的例行水样中进行双样分析，若是例行水样的双样分析结果差域平均值大于3.27R，则说明实验中化验员的操作精度控制不足，需要分析实验操作中存在的问题，并对问题进行及时应对解决，避免重新实验后再出现同样问题。

4.2 无菌性检查

每完成一次实验以后，化验员应以灭菌水为水样，对实验中所使用的培养基、滤膜、稀释水、冲洗用水等诸多仪器设备及材料进行无菌性检查，若是发现相关仪器设备及采用存在杂菌感染情况，则应否定以上过程实验中所获取的数据信息结果，保障研究的精准性和有效性。此外，原则上来说，为保障实验结果的可重复性，在下一次实验过程中应对上一次实验中所采用的水样中的10%水样进行重复检测，并通过重复检测结果与上一次检测结果进行匹配对比，以此来检验上一次分析结果的精准性。

近些年来，随着社会对于水质环境安全问题的日益关注，如今水质环境监测相关技术得到快速发展，提高监测精度及效率的同时，也逐步开始实现智能化、自动化发展。但无论如何发展，为保障水质环境监测中微生物检测技术的应用效果，就必须要提高微生物检测技术应用时的质量控制工作，具体质量控制内容包括微生物样品采集阶段的质量控制、实验准备阶段质量控制、实验阶段质量控制以及结果评价系统质量控制，相关质量控制成效将会直接影响到水质环境监测中微生物检测技术应用成效，所以必须要提高相关重视，最终为后续水质环境安全保障提供重要支持。

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