紫荆花总黄酮的提取及在牙膏中的应用

李江平 黄晓燕 王小敏 许 逊

(柳州两面针股份有限公司技术中心,广西 柳州 545001)

据统计，我国人群口腔患病率达 80% 以上，并已威胁到各个年龄段的人群，口腔护理迫在眉睫。常见的口腔问题包括龋病、牙周炎等。有关研究显示，口腔菌属的分类也较细，以厌氧菌为多。其中，龋病的主要致病菌为变形链球菌，是造成龋齿的主要原因；
牙周炎的主要致病菌为牙龈卟啉单胞菌，其可能作为内源性致病菌在特定条件下过度生长而导致牙周破坏，同时也是口臭主要致病厌氧菌，甚至是成人失牙的主要原因。选择合适的口腔抑菌护理产品,可以有效地控制口腔有害细菌增长，使我们在日常生活中轻松地预防口腔疾病的发生。

近年来，以作用温和且具有一定功效的中草药提取物作功效添加剂应用于日用品中已经成为新产品开发热点。现代药理学表明：黄酮类化合物具有抗菌消炎、抗氧化美白等多种功效 。

紫荆花，系豆科紫荆属植物，全国大部分地区均有分布，其中华南地区分布最广。据《中药大辞典》记载，紫荆花具有清热凉血、去风解毒的等功效。研究发现，紫荆花中含有大量的总黄酮，总黄酮是指黄酮类化合物，是以α-苯基苯并吡喃酮为主体的一系列物质的总称，主要类型有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、双黄酮和异黄酮。

1.1 黄酮类有机物的提取

1.1.1 紫荆花总黄酮提取物

采用乙醇回流提取技术，称取紫荆花花粉 100g，捣碎研磨后，加入75%食用乙醇2000mL, 70℃回流2h,过滤，滤渣中再加1000 mL 75%乙醇70℃回流2h，合并滤液，抽滤。滤液减压浓缩得浸膏，真空干燥。

表1 紫荆花的提取率

1.1.2 紫荆花黄酮类化合物含量的测定

1.1.2.1 黄酮类化合物标准曲线绘制

精确称取干燥至恒重的芦丁对照品5.0mg于25mL容量瓶中，用70%乙醇溶解、定容。分别称取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL标准品溶液于25mL容量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液1mL，混匀，放置6min，加入10%硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6min，加入10%氢氧化钠溶液10mL，加水至刻度，摇匀，放置156min。用分光光度法，在510nm波长测定吸光度。

表2 芦丁标准液含量与吸光度的关系

1.1.2.2 紫荆花黄铜含量测定

精确称取紫荆花浸膏粉末用70%乙醇溶解并定容至25mL。吸取取样品液3.00mL，置于25mL容量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液1mL，混匀，放置6min，加入10%硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6min，加入10%氢氧化钠溶液10mL，加水至刻度，摇匀，放置156min。用分光光度法，在510nm波长测定吸光度。

表3 紫荆花提取物总黄酮含量和紫荆花总黄酮得率

1.2 紫荆花总黄酮提取物抑菌试验

采用最小抑菌浓度(MIC)试验方法，用无菌蒸馏水将紫荆花总黄酮提取物按成倍稀释成不同的质量浓度下对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、牙龈卟啉单胞菌和变形链球菌的抑制情况如表4，从而确定紫荆花提取物的最小抑菌浓度(MIC)。

表4 不同浓度紫荆花提取物对大肠杆菌、 金黄色葡萄球菌、牙龈卟啉单胞菌、变形链球菌的MIC值

由表4可知，紫荆花总黄酮提取物对供试菌大肠杆菌的抑菌MIC值为0.391%，紫荆花总黄酮提取物对供试菌金黄色葡萄球菌的抑菌MIC值为0.391%，紫荆花总黄酮提取物对供试菌牙龈卟啉单胞菌的抑菌MIC值为0.782%，紫荆花总黄酮提取物对供试菌变形链球菌的抑菌MIC值为0.782%。

1.3 青紫荆花总黄酮提取物牙膏的配伍研究

采用二氧化硅牙膏基质配方表5，将紫荆花总黄酮提取物添加到牙膏配方基质进行配伍性研究与测试，保证含紫荆花总黄酮提取物牙膏的稳定性。

表5 青蒿提取物牙膏配方

牙膏稳定性测试：测试依据为GB/T 8372。取样3支牙膏，放3支到-8℃冰箱中 8 小时，取出牙膏后放入 45℃恒温培养箱8小时，再取出试样牙膏放在常温处，稳定性无异常。

1.4 紫荆花总黄酮提取物牙膏的抑菌效果

按照《消毒技术规范(2002 版)》2.1.11.3.2溶出性抗(抑)菌产品抑菌性能测试方法中规定的检测方法。样品作用浓度1∶1，作用时间5min，试验菌种为金黄色葡萄球菌 (ATCC 6538)和大肠杆菌 (ATCC 25922)、牙龈卟啉单胞菌(ATCC 33277)、变形链球菌(ATCC 25175)标准菌种，试验重复3次；
抑菌率≥50%时，产品为有效抑菌，抑菌率≥90%时，产品有较强抑菌作用。

表6 青蒿提取物牙膏抑菌效果的检测结果

1.5 紫荆花总黄酮提取物牙膏的止血效果

紫荆花总黄酮提取物牙膏止血作用药理实验，采用兔肝脏局部创面损伤出血模型，在出血创面局部敷涂样品后，观察记录止血时间，计算止血效果分值F。

表7 受试样品对兔肝脏局部创面 损伤出血的止血效果

口腔中的炎症主要有牙龈炎、牙周炎等，其表现为牙齿肿胀、出血、疼痛等症状。止血药理试验结果显示：含紫荆花总黄酮提取物牙膏对样品能兔肝脏局部创面损伤出血有明显止血作用。

现代药理学表明，黄酮类化合物具有抗菌消炎、抗氧化美白等多种功效。本研究对紫荆花总黄酮提取物的最小抑菌浓度(MIC)值进行测试，其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、牙龈卟啉单胞菌和变形链球菌的具有较强抑制作用；
对紫荆花总黄酮提取物与牙膏基质复配后有效含量值的牙膏抑菌效果进行检测，紫荆花总黄酮提取物牙膏对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、牙龈卟啉单胞菌、变形链球菌均具有一定的抑菌性能；
对紫荆花总黄酮提取物牙膏进行动物止血药理试验，具有较好的止血效果。中草药因“纯天然”的特点受到现代人的认同，以其为原料生产的日化产品、保健品等均受到广大消费者的热捧。开发中药抑菌成分，并在发挥抑制口腔有害菌的同时，减少耐药性的产生，能降低化学剂用量及刺激性，达到保障口腔清洁卫生健康、维护口腔微生态平衡的目的，符合并满足消费者需求。将中草药抑菌成分应用于产品中，该技术的市场应用前景广阔，必将受到广大消费者青睐。

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