包艳 尹春琼 耿娅萍 吕金娥 董静
作者单位:655000 云南曲靖,云南省曲靖市第二人民医院检验科
白血病是一种造血干细胞恶性增殖性疾病,急性白血病是白血病的一种,主要表现为在较早阶段出现血细胞分化阻滞。胸骨压痛、肝脾和淋巴结肿大为白血病的主要临床症状,同时可以出现不同程度的贫血、出血和感染。由于白血病细胞大量增生,骨髓腔内压力增高,以及白血病细胞浸润,使窦样隙屏障被破坏,各阶段的不成熟细胞进入血液,浸润其他器官和组织,外周血常出现白细胞增多,并可见各阶段幼稚细胞,以及出现髓外白血病浸润现象[1]。白血病的发病率在各类肿瘤中位居第六,是儿童和青年中最常见的一种恶性肿瘤,约占肿瘤总患者数的3%。目前我国有约400万名白血病患者,且患者的增长速度在近年来呈现逐渐升高的趋势,每年约有新增白血病患者6.6万名,病死率也逐渐增高,每年约有5.5万名白血病患者死亡[2]。目前,白血病的诊断主要依据患者的临床表现、血象及骨髓象,以及基因检测;
并与骨髓增生异常综合征(elodysplastic syndromes,MDS)等疾病进行鉴别诊断。白血病最常用的初筛手段为血常规检查,通过观察血常规指标变化,早期诊断白血病一直是检验支撑临床的重要体现[3]。本研究以2013年9月28日—2022年3月31日曲靖市第二人民医院收治的129例白血病患者作为研究对象,对其血常规指标及白细胞散点图等资料进行回顾性分析,旨在探讨白细胞散点图联合血常规指标在白血病初筛中的应用价值,现将结果报告如下。
1.1研究对象及分组 选择曲靖市第二人民医院2013年9月28日—2022年3月31日收治的首次诊断为急性白血病的129例患者作为研究对象,纳入急性白血病组;
另外选择同期入院体检的100名健康体检者作为对照组。
1.1.1纳入标准 首次在本院确诊为急性白血病。
1.1.2排除标准 ① MDS患者;
② 其他原因导致白细胞异常;
③ 近期使用过可能导致血常规指标发生变化的药物;
④ 患有巨幼细胞性贫血。
1.1.3伦理学 本研究符合医学伦理学标准,并经本院伦理委员会审批(审批号:2022-074-01),所有检测均获得过本人或家属的知情同意。
1.2仪器与试剂 sysmex系列全自动血细胞分析仪(包括XN9000、XT-4000i、XT-2000i型号,购自日本希森美康株式会社);
奥林巴斯CX53显微镜〔购自奥林巴斯(中国)有限公司〕;
瑞氏-吉姆萨染色液(购自珠海贝索公司);
乙二胺四乙酸二钾(dipotassium ethylene diamine tetraacetate,EDTA-K2)真空抗凝管。
1.3研究方法 急性白血病组患者确诊后于治疗前进行血常规检查,检查前禁烟、酒,检查日晨起空腹采血。采用全自动血细胞分析仪检查血常规,统计两组白细胞计数(white blood cell count,WBC)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)与血小板计数(platelet count,PLT)水平。利用射频、电阻抗和细胞化学染色法原理,通过结合幼稚细胞计数、免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)、白细胞分类散点图来进行白血病筛查和初步分类。对于出现异常白细胞分类散点图的标本进行染色镜检,判断是否存在异常细胞。回顾分析急性白血病组的血常规及白细胞分类散点图,结果显示WBC处于正常参考值范围的急性白血病患者有20例,对这20例患者进行分析。
1.4正常参考值范围 WBC:(4.0~10.0)×109/L。Hb:男性120~160 g/L,女性110~150 g/L;
老年人(70岁以上):男性94.2~122.2 g/L,女性86.5~111.8 g/L。PLT:(100~300)×109/L。
1.5白细胞散点图各区域判读 全自动血细胞分析仪主要借助半导体激光流式细胞计数和核酸荧光技术检测血液中的有形细胞,借助光学检测器进行分析,利用半导体激光束,使用流式细胞计量方法检测前向散射光、侧向散射光和侧向荧光,并绘制二维散点图和直方图。通过结合WBC、Ig、幼稚细胞计数、白细胞分类散点图来进行白血病筛查和初步分类。流式激光散射联合荧光染色技术的基本原理是在鞘流作用下,以波长633 nm激光照射细胞,收集三类信号:① 前向散射光FSC反映细胞体积大小;
② 侧向散射光SSC反映细胞内部构造复杂程度;
③ 侧向荧光SFL反映细胞内核酸及细胞器种类和多少。在散点图上X轴表示侧向散射光的强度,Y轴则表示侧向荧光的强度。见图1。
图1 白细胞散点图各区域判读
1.6统计学分析 采用SPSS 23.0软件分析相关数据。计量资料符合正态分布以均数±标准差(±s)表示,采用t检验;
计数资料以例(%)表示,采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2.1一般资料 两组性别、年龄等一般资料比较差异均无统计学意义(均P>0.05),有可比性。见表1。
表1 对照组和急性白血病组的一般资料比较
2.2两组血常规指标水平比较 急性白血病组的WBC水平明显高于对照组,Hb和PLT水平均明显低于对照组(均P<0.05)。见表2。
表2 急性白血病组和对照组的血常规指标水平比较(±s)
表2 急性白血病组和对照组的血常规指标水平比较(±s)
注:WBC为白细胞计数,Hb为血红蛋白,PLT为血小板计数
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2.3急性白血病患者血细胞数目异常情况和白细胞分类散点图比较 20例WBC正常的患者白细胞分类散点图都存在异常。见图2。129例急性白血病患者中,WBC水平升高61例,降低39例,异常率为77.52%(100/129);
Hb水平升高4例,降低110例,异常率为88.37%(114/129);
PLT水平升高2例,降低103例,异常率为81.40%(105/129)。见表3。
表3 急性白血病患者血常规指标异常情况比较
图2 20例白细胞计数正常的急性白血病患者白细胞分类散点图
白血病的发病机制是因为造血干细胞异常的克隆增殖失控,细胞凋亡受阻,白血病细胞在骨髓中大量积聚,正常的造血功能受到抑制,临床上以胸骨压痛、肝脾和淋巴结肿大为主,同时可以出现不同程度的出血、贫血和感染等症状;
白血病细胞的大量增生导致了骨髓腔内压力增高,同时白血病细胞浸润,最终窦样隙屏障遭到破坏,因此各阶段的不成熟细胞可以顺利进入血液,浸润其他器官和组织。因此在外周血象中表现出白细胞增多,并可见各阶段幼稚细胞,同时还出现髓外白血病浸润。世界卫生组织(World Health Organization,WHO)对白血病的诊断标准:① 外周血/骨髓原始粒(或单核)细胞比例≥20%,可诊断为急性髓系白血病;
② 骨髓中原始/幼稚淋巴细胞≥20%,可诊断为急性淋巴细胞白血病/淋巴母细胞淋巴瘤[4]。
随着白血病诊断水平的不断提高,其发病检出率也呈逐年上升趋势,尤其出现大量症状隐匿和体征不典型的病例,入院体检血常规时发现异常,并在进一步的检查中确诊。本院统计的129例急性白血病中,血常规结果有109例WBC异常,20例WBC正常。其中20例WBC正常的白血病患者白细胞散点图存在异常情况。此类患者若发现不及时,便很容易造成漏检,延误治疗的最佳时机,造成患者死亡。相关研究指出,白细胞分类散点图在急性白血病的早期诊断中具有重要的提示作用,异常散点图对于白血病初筛以及辅助判断白血病类型的具有较高的指导价值[5-6]。血细胞分析仪借助半导体激光流式细胞计数和核酸荧光技术检测血液有形细胞;
借助光学检测器进行分析,利用半导体激光束,使用流式细胞计量方法检测前向散射光、侧向散射光、侧向荧光,并绘制二维散点图和直方图。血细胞分析仪的主要工作原理是以低频电流完成对细胞体积的测量,高频电磁实现对细胞内含物的检测,单色激光散射实现对细胞具体形状、构造等信息的确认[7-8]。结合核酸含量及细胞质内存在的颗粒大小等,系统性地进行分析。白血病一旦发病,无论是血细胞计数或成分都会发生明显改变,在散点图上具有特征性变化[9]。白细胞散点图筛选出疑似白血病患者,再使用显微镜完成对疑似白血病患者的复检,可以有效提升初筛的准确率。
本研究结果显示,129例急性白血病患者中,WBC异常率为77.52%,Hb异常率为88.37%,PLT异常率为81.40%。其中20例WBC处于正常参考值范围内的患者白细胞分类散点图均存在异常。109例患者综合分析血常规指标和白细胞散点图变化,及时与临床沟通,建议下一步检查,降低初诊白血病患者的漏诊率[10-11]。
综上,日常临检工作通过分析血常规相关指标和白细胞散点图的异常结果,可提高白血病的初筛检出率。同时可以为临床诊断白血病提供重要的参考,缩短诊断时间,以及病情监测均有重要的价值。
利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突
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