细胞凋亡形态学实验观察

下面是小编为大家整理的细胞凋亡形态学实验观察,供大家参考。

　首都师范大学生命科学学院实验报告

　姓名

　胡瑱霞

　刘畅

　学号

　11208000011

　1120800017

　成绩

　课程名称

　细胞学实验

　时间

　星期三

　（上/ / 下）

　上午

　实验题目

　细胞凋亡形态学实验观察

　【实验目的】

　1.了解植物细胞程序性死亡（PCD）的概念。

　2.掌握植物细胞 PCD 的诱导和观察的基本方法和统计方法。

　3.植物细胞凋亡的形态观察。

　【实验原理】

　1.细胞凋亡是一个主动的由基因决定的自动结束生命的自然过程; 由严格的遗传基因机制决定的程序性调控，又称细胞程序性死亡。

　2.细胞凋亡以及细胞坏死的区别：

　细胞凋亡 细胞坏死 细胞膜内陷变样但完整 细胞分为一个个凋亡小体 被周围细胞吞噬，无炎症反应 核染色质凝聚固缩、趋边化、DNA 有序裂解 细胞膜破裂、胞浆外溢

　引起严重的炎症反应

　 3.细胞凋亡的意义：细胞凋亡是动物生命过程中不可缺少的组成部分, 正常的生命体一方面通过细胞分裂来产生新的细胞；另一方面又通过程序性细胞死亡来清除“无用”的细胞；当这种程序发生紊乱时, 就会发生相关的疾病。

　【实验结果与分析】

　1.凋亡计数

　 凋亡细胞数 总细胞数 凋亡率 视野 1 视野 2 视野 3 视野 1 视野 2 视野 3 0.1mol/L Ca2+ 2 小时诱导 18 13 21 31 35 34 52.3% 0.5 mol/L Ca2+ 15min 2 3 4 33 35 37 8.5% 对照组 2 5 6 31 38 35 12.25%

　2.0.1M Ca 离子与对照组

　（1）现象：

　0.1M 的 Ca2+处理

　未经过特殊处理的对照组

　（2）分析：0.1mol/L Ca 离子处理细胞可以诱导细胞凋亡。未经任何处理的对照组细胞核边缘较圆润光滑；而实验组的细胞核已发生变形，周围还散布有一些颜色较深的碎片状物质，这可能是细胞凋亡过程中细胞核内的染色质发生凝集，核膜核仁破碎，故有一些染色质游离出来，同时细胞膜结构依然完整。

　3.0.5M Ca 离子与对照组

　（1）现象

　0.5M 的 Ca2+处理

　未经过特殊处理对照组

　（2）分析：Ca 离子的升高是细胞发生凋亡的一个重要信号，但从图中可以看出，0.5M 的 Ca 2 离子 处理的实验组的细胞并没有像预期的哪样，发生比 0.1M 的 Ca2 离子处理的实验组更加严重的细胞凋亡，甚至凋亡率要比对照组还大，同时细胞出现了严重的质壁分离现象。根据分析，我们得出如下可能的原因：

　 可能是因为加入 0.5M 的这个浓度 Ca2+离子浓度有些偏高，溶液渗透压较大，使得细胞失水，所以出现了严重的质壁分离现象。那么细胞发生质壁分离会影响到细胞凋亡吗？关于这一点我们认为可能会由于细胞生了比较严重的质壁分离，

　进而导致细胞内的环境发生了变化，影响到了细胞内的一些酶的活性。而发生细胞凋亡是需要各种酶的作用的，酶的活性降低了，细胞的细胞凋亡的过程也就受到了影响。这也是为什么在用 0.5M 的 Ca2+再次处理后的一组的细胞凋亡率反而更小的原因。

　【实验反思】

　1.本次实验中，第二个实验组的实验现象不符合预期，具体的原因分析也已写在了实验结果分析中，以后做实验的时候为了进一步验证我们的猜想，可以将处理时间增加到 2hour，这样才能使结果更有说服力。